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伯豪生物
師兄又發(fā)文章了,我看著手里的冰凍組織很著急!
發(fā)布時間:2021-02-24 瀏覽次數(shù):5599
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伯豪生物單細(xì)胞核產(chǎn)品加服務(wù): 帶你乘風(fēng)精準(zhǔn)研核,發(fā)文章沖擊國自然!

伯豪生物單細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄組測序(single-nucleus RNA sequencing,snRNA-seq)是從組織抽提細(xì)胞核,然后在單個細(xì)胞核水平上對轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行高通量測序分析的一項(xiàng)新技術(shù),通過檢測單個細(xì)胞核的基因表達(dá)狀態(tài),進(jìn)而揭示細(xì)胞間的異質(zhì)性。


技術(shù)流程

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單細(xì)胞核 RNA 測序(snRNA-seq)的優(yōu)勢

1)冷凍組織可以用于直接抽提細(xì)胞核,為臨床回顧性研究中單細(xì)胞測序的開展提供了解決方案。

2)有些組織通過酶解消化很難拿到高質(zhì)量的細(xì)胞懸液,通過抽提細(xì)胞核,避開酶解消化,是一個更好的選擇。

3)適用于對解離酶敏感(如神經(jīng)元、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞)、直徑較大、形狀不規(guī)則(如心肌細(xì)胞)等特殊細(xì)胞類型。

4)直接從組織抽提細(xì)胞核,不需要酶解消化及恒溫孵育,避免了組織解離過程中誘導(dǎo)應(yīng)激基因的表達(dá)。


伯豪生物單細(xì)胞核 RNA 測序優(yōu)勢

1、高質(zhì)量抽核:抽核經(jīng)驗(yàn)豐富,針對不同組織優(yōu)化了解決方案;

2、標(biāo)準(zhǔn)化內(nèi)控:豐富的實(shí)操經(jīng)驗(yàn)構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)控體系;

3、流程化分析:完善的分析流程,準(zhǔn)確快速解析單細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù);

4、專業(yè)化團(tuán)隊(duì):資深的技術(shù)團(tuán)隊(duì)具有多年項(xiàng)目方案設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)操作、售后分析等經(jīng)驗(yàn);

5、全流程服務(wù):提供組織抽核、單細(xì)胞核捕獲、反轉(zhuǎn)錄、建庫測序及數(shù)據(jù)分析的全套服務(wù)。


伯豪生物豐富的單細(xì)胞核抽提經(jīng)驗(yàn)

利用自主研發(fā)的“伯優(yōu)細(xì)胞核分離試劑盒”已經(jīng)完成大腦皮層、下丘腦、海馬、延髓、松果體、肝臟、心臟、膠質(zhì)瘤、骨、乳腺和胰腺等 20 多種組織的抽核制備及上機(jī)測序。

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送樣要求

1、組織用量:黃豆粒大小  1  塊;

2、樣本處理:組織液氮速凍,-80℃保存;

3、質(zhì)量要求:組織  RNA  無降解,RIN≥7;

4、運(yùn)輸方式:干冰運(yùn)輸。


應(yīng)用方向

冷凍樣本;通過消化難拿到高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液的組織類型。


結(jié)果展示

1)腦組織

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▲腦組織 snRNA-seq 細(xì)胞類群注釋結(jié)果  

腦組織 snRNA-seq 各種細(xì)胞類型比例:神經(jīng)元(Neurons)73.0%;星形膠質(zhì)細(xì)胞(Astrocytes)9.4%;少突膠質(zhì)細(xì)胞(Oligodendrocytes)9.2%;內(nèi)皮細(xì)胞(Endothelial cells)6.7%;小膠質(zhì)細(xì)胞(Microglial cells)1.4% 及嗅鞘膠質(zhì)細(xì)胞(Olfactory ensheathing glia)0.4%。

2)心臟組織

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▲心臟組織 snRNA-seq 細(xì)胞類群注釋結(jié)果

心臟組織 snRNA-seq 各種細(xì)胞類型比例:心肌細(xì)胞(Cardiomyocytes)38.8%;內(nèi)皮細(xì)胞(Endothelial cells)30.3%;成纖維細(xì)胞(Fibroblasts)16.6;神經(jīng)元細(xì)胞(Neuronal cells)6.3%;巨噬細(xì)胞(Macrophages)6.0%;Monoblasts 0.8%;間皮細(xì)胞(Mesothelial cells)0.6%;T 和 B 細(xì)胞分別占 0.4%;中性粒細(xì)胞(Neutrophil cells)0.4%;脂肪細(xì)胞(Adipocytes)0.2% 及髓細(xì)胞(Myeloid cells)0.1%。

3)肝臟組織

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▲肝臟組織 snRNA-seq 細(xì)胞類群注釋結(jié)果  

肝臟組織 snRNA-seq 各種細(xì)胞類型比例:肝細(xì)胞(Hepatocytes)56.0%;內(nèi)皮細(xì)胞(Endothelial cells)10.9%;膽管細(xì)胞(Cholangiocytes)9.4%;成纖維細(xì)胞(Fibroblasts)9.2%;星狀細(xì)胞(Stellate cells)8.7%;T 細(xì)胞 4.7% 及 B 細(xì)胞 1.1%。


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