空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析的核心是根據(jù)每個芯片上每個 spot 的基因表達信息進行聚類，然后將 spot 根據(jù)坐標(biāo)位置序列放回到組織的圖像上，同時可以對每個 gene 在組織上表達的空間位置進行定位。

獲得測序數(shù)據(jù)后，首先利用 Space?Ranger? 軟件可以自動化的對圖像進行處理、數(shù)據(jù)比對和 Barcode 處理。另外一個軟件 Loupe?Cell?Browser 是一個適用于 Windows 和 MacOS 的桌面應(yīng)用程序，它可以快速、輕松地可視化和分析 10X?Visium 數(shù)據(jù)。伯豪生物除了提供 spot 基因數(shù)和 UMI 數(shù)統(tǒng)計、切片 spot 聚類和聚類亞群 marker 基因分析等基礎(chǔ)和高級分外，同時還提供個性化分析，如特定 pathway 功能富集分析等。

圖 ? 每個 spot 特異表達的基因數(shù)統(tǒng)計

圖 ? 聚類結(jié)果及切片 spot 位置分布展示

圖 特定 pathway 功能富集分析

結(jié)合組織區(qū)域分布對數(shù)據(jù)進行挖掘

大部分組織其實是有其特定的區(qū)域劃分的，比如說大腦里有皮層、丘腦、海馬、脈絡(luò)叢等多個區(qū)域。將組織的區(qū)域劃分和亞群（或細(xì)胞類型）的分布結(jié)合起來還是能發(fā)現(xiàn)很多有價值的信息的。

可以根據(jù)不同區(qū)域特異表達的 maker 基因的分布來判斷每個區(qū)域在組織切片上的位置。例如皮層 marker 基因 STX1A 的表達分布，海馬 marker 基因 HPCA 的表達分布等

結(jié)合病理學(xué)特征對數(shù)據(jù)進行挖掘

空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)正真的精髓不是研究細(xì)胞亞群的分布，而在于將它在空間位置上體現(xiàn)的異質(zhì)性跟組織病理學(xué)特征的分布進行結(jié)合，挖掘在不同病理學(xué)特征下轉(zhuǎn)錄組學(xué)的差異。這對于研究疾病病變的機制、幫助臨床實現(xiàn)更好的患者分子分型、以及空間位置 Biomarker 的挖掘方面都是非常有價值的。通過手動把這些區(qū)域圈出來進行轉(zhuǎn)錄組層面的比較，找出不同病灶區(qū)的特異性 marker，分析疾病在一步步發(fā)展進程中生物學(xué)功能的變化，甚至可以思考一下是否能找出一些關(guān)鍵性因子來阻斷疾病的進展。

圖 ? 根據(jù)病理信息選取特定區(qū)域分析

空間轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合單細(xì)胞 RNA 測序解析細(xì)胞類型的空間位置信息（Multimodal?intersection?analysis,MIA)

空間轉(zhuǎn)錄組測序可以獲得不同基因在組織切片上的空間位置信息，但不能獲得詳細(xì)的細(xì)胞類群信息（空間轉(zhuǎn)錄組不是單細(xì)胞分辨率，只能粗略的分析切片上不同位置的細(xì)胞類型）。因此，需要借助但細(xì)胞測序數(shù)據(jù)來分析細(xì)胞類型，然后通過生物信息學(xué)的分析方法將單細(xì)胞類群映射到空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)上。

圖 ?MIA 熱圖

備注：MIA 熱圖，上方的顏色條反映了 ST 區(qū)域的子聚類（cancer?region，Pancreatic?tissue，Duct?epithelium 和 stroma）。左側(cè)代表不同的細(xì)胞類群。色塊代表 enrichment 或者 depletion。Enrichment 代表該細(xì)胞類群富集到了該區(qū)域。Depletion 代表該細(xì)胞類群在該區(qū)域缺失。

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