外泌體形成是由細(xì)胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體，再形成多泡體，之后分泌到胞外。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA 和 RNA 等重要信息，而非編碼 RNA（包括 miRNA、lncRNA、circRNA 等）在調(diào)控基因表達(dá)等方面有著重要作用，對外泌體中的 miRNA、lncRNA、circRNA 進(jìn)行研究不僅能夠深入了解疾病或不同發(fā)育階段的內(nèi)在機(jī)制，而且篩選外泌體特異 biomarker 也有著非常高的臨床應(yīng)用價(jià)值。隨著液態(tài)活檢及體外診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，外泌體正在成為較新的疾病診斷標(biāo)志物。

有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的高精度分子機(jī)制近些年剛剛開始受到關(guān)注，與外泌體相關(guān)的被 pubmed 收錄的文章數(shù)量（圖 1) 和國自然基金項(xiàng)目中標(biāo)數(shù)量及資助金額逐年增長（圖 2），表明國內(nèi)外對外泌體的研究興趣日益增長。今天小編就跟大家分享新鮮出爐的兩篇外泌體相關(guān)研究（IF>10）。

M2 巨噬細(xì)胞來源的外泌體通過向腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移 αMβ2 整合素促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移

M2 macrophage-derived exosomes facilitate hepatocarcinoma metastasis by transferring αMβ2 integrin to tumor cells

期刊：Original

影響因子：14.679

發(fā)表日期：2020 年 6 月 28 日

單位：南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院、東南大學(xué)

摘要：肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)展和進(jìn)展取決于其局部微環(huán)境。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）被認(rèn)為是腫瘤微環(huán)境的關(guān)鍵因素并且歸因于腫瘤侵襲性。然而，TAMs 對 HCC 的促轉(zhuǎn)移作用的詳細(xì)機(jī)制仍未確定。本研究表明 TAM 富含 HCC。TAM 的特征在于 M2 極化表型和體外和體內(nèi)加速 HCC 細(xì)胞的遷移潛力。此外，我們還發(fā)現(xiàn) M2 衍生外泌體誘導(dǎo)了 TAM 介導(dǎo)的促移動(dòng)活性。通過質(zhì)譜分析，我們發(fā)現(xiàn)整合素 αMβ2（CD11b/CD18）在 M2 巨噬細(xì)胞衍生的外泌體（M2-exos）中具有顯著的特異性和有效性。阻斷 CD11b 和 / 或 CD18 引起 M2-exos 介導(dǎo)的 HCC 細(xì)胞轉(zhuǎn)移的顯著降低。從機(jī)制上說，M2-exos 介導(dǎo) CD11b/CD18 的細(xì)胞間轉(zhuǎn)移，激活受體 HCC 細(xì)胞中的 MMP- 9 信號傳導(dǎo)途徑以支持腫瘤遷移?？傊?，外泌體介導(dǎo)的功能性 CD11b/CD18 蛋白從 TAMs 轉(zhuǎn)移到腫瘤細(xì)胞可能具有促進(jìn) HCC 細(xì)胞遷移潛力的潛力，從而為腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制提供新的見解。

肝癌細(xì)胞來源的外泌體 circUHRF1 誘導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞衰竭并可能對肝細(xì)胞癌抗 PD1 治療產(chǎn)生耐藥性

Cancer cell-derived exosomal circUHRF1 induces natural killer cell exhaustion and may cause resistance to anti-PD1 therapy in hepatocellular carcinoma

期刊：Molecular Cancer

影響因子：15.302

發(fā)表日期：2020 年 6 月 29 日

單位：復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院

摘要：自然殺傷（NK) 細(xì)胞在天然抗腫瘤免疫反應(yīng)中起著至關(guān)重要的作用，近年來，NK 細(xì)胞功能障礙已在包括肝細(xì)胞癌（HCC) 在內(nèi)的各種惡性腫瘤中得到證實(shí)）。然而，NK 細(xì)胞功能障礙在人肝癌中的分子生物學(xué)機(jī)制尚不清楚。本研究用 qRT-PCR 檢測肝癌組織、外泌體和細(xì)胞系中 PHD 和環(huán)指結(jié)構(gòu)域 1RNA(circUHRF1) 的環(huán)狀泛素樣表達(dá)。使用超速離心法和 ExoQuick 外泌體沉淀溶液試劑盒從 HCC 細(xì)胞和 HCC 患者血漿的培養(yǎng)基中分離外泌體，然后用透射電鏡、粒徑和 westernblot 進(jìn)行表征。通過 ELISA 評估 circUHRF1 在 NK 細(xì)胞功能障礙中的作用。進(jìn)行體內(nèi) circRNA 沉淀，RNA 免疫沉淀和熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)以探索 circUHRF1 在 NK 細(xì)胞中的分子機(jī)制，確定了 circUHRF1 在 HCC 組織中的臨床特征和預(yù)后意義。研究發(fā)現(xiàn) circUHRF1 水平升高表明 HCC 患者臨床預(yù)后不良和 NK 細(xì)胞功能障礙。在 HCC 患者血漿中，circUHRF1 主要由 HCC 細(xì)胞以外泌體方式分泌，并且 circUHRF1 抑制 NK 細(xì)胞衍生的 IFN- γ 和 TNF- α 分泌。高水平的血漿外泌體 circUHRF1 與 NK 細(xì)胞比例降低和 NK 細(xì)胞腫瘤浸潤減少有關(guān)。此外，circUHRF1 通過降解 miR-449c-5p 上調(diào) TIM- 3 的表達(dá)來抑制 NK 細(xì)胞功能，研究證明 circUHRF1 可能驅(qū)動(dòng)肝癌患者抗 PD1 免疫治療的耐藥性，并為 HCC 患者提供潛在的治療策略。

今天介紹的兩篇文章都是從分子機(jī)制方向展開研究，外泌體研究主要有三大思路，表達(dá)譜、分子標(biāo)志物及分子機(jī)制方向。這三類研究均依托高通量測序揭示外泌體攜帶 RNA 分子對細(xì)胞功能造成影響。機(jī)制方向比較特殊，一種思路是直接研究差異外泌體 RNA 對細(xì)胞造成影響及分子功能；而另一種思路是將外泌體與研究細(xì)胞共培養(yǎng)后，對共培養(yǎng)及單獨(dú)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行測序，從而找到外泌體具體作用目的細(xì)胞靶基因。

Shbio Human circRNA array V1.0

Agilent Human miRNA array V21.0

Affymetrix  Human  miRNA 4.0 Array